色譜柱的柱效能是評價色譜性能的一項重要指標,混合物能否在色譜柱中得到分離,除取決于選擇合適的固定相外,還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關。在一定的色譜操作條件下,色譜柱的柱效可用理論塔板數(shù)或理論塔板高度來衡量。一般說來塔板數(shù)愈多,或塔板高度愈小,色譜柱的分離效能愈好。
要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。
(1)降低移動相的流速,但會使分析時間延長。
(2)減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。
(3)減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后離子色譜柱的滲透率也會減小。
(4)選用低粘度的移動相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。
(5)適當提高柱溫,可降低移動相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。
(6)盡量減小停滯移動相的體積,但卻加快了移動相的流速。
從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是互相聯(lián)系和制約的。只有通過對柱效值的跟蹤測算,對自己分析方法不斷的研究和實踐,才能找到理想的工作條件。
我們也應記住柱效值并不足以預測在所有條件下的柱性能,對大多數(shù)色譜工作者來說,柱性能指的是離子色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有高柱效并不能保證這種分離能力。